Identification moléculaire des unités de typage discret de Trypanosoma cruzi dans la cardiopathie chronique de Chagas en phase terminale et la réactivation après transplantation cardiaque

Contexte Cent ans après la découverte de la maladie de Chagas, elle reste une maladie tropicale négligée majeure Maladie cardiaque chronique de Chagas cChHD est la manifestation la plus grave La transplantation cardiaque est le traitement approprié pour l’insuffisance cardiaque en phase terminale, bien que la réactivation de la maladie puisse survenir après traitement immunosuppresseur Les souches de T cruzi se regroupent en unités de typage discrètes DTU; I-VI associé à une distribution géographique différente, cycles de transmission et symptômes variés Dans le cône sud de l’Amérique du Sud, les populations T cruzi II, V et VI semblent être associées à la maladie de Chagas et au T cruzi I avec des cycles sylvatiques. On a réalisé des génotypes de T cruzi I sur la base de polymorphismes géniques épissés et de minicercle à l’aide d’échantillons d’explants cardiaques et d’échantillons de sang provenant d’une cohorte de patients argentins atteints de cChHD et ayant subi une transplantation cardiaque. présenté avec réactivation clinique de la maladie de Chagas. Résultats La persistance du parasite était associée à la progression de la myocardite, révélant le génotype T cruzi I dans les échantillons d’explant et T cruzi II, V ou VI dans les échantillons d’explants. I chez les patients génotypes Ia ou Id et T cruzi II, V ou VI en patie T cruzi I, V et VI ont été détectés dans des échantillons de chagoma de la peau, et T cruzi V et VI ont été détectés dans des échantillons provenant de patients présentant des réactivations de myocardite DTU multiples ou génotypes à divers sites corporels et signatures minuscules polymorphes dans différentes régions cardiaques ont révélé un parasite Histotropisme Les infections à T. cruzi I se sont regroupées au nord de l’Argentine, ° S- ° S, tandis que les DTU T cruzi II, V ou VI étaient plus omniprésentes. Conclusions Les DTU multiples coexistent chez les patients atteints de la maladie de Chagas. étonnant, révélant son rôle pathogène dans cChHD au cône sud

Cent ans après sa découverte, la maladie de Chagas reste une maladie tropicale négligée majeure affectant des millions de personnes infectées par Trypanosoma cruzi dans les pays d’endémicité et émergeant dans des régions où elle n’est pas endémique à cause des mouvements migratoires La maladie de Chagas a une évolution clinique, pour laquelle la manifestation la plus commune est la maladie cardiaque c- ChHD, qui affecte ~% des personnes atteintes de la maladie de Chagas et représente la principale cause de myocardite dans le monde La transplantation cardiaque est un traitement valable pour l’insuffisance cardiaque Le pléomorphisme des manifestations de la maladie de Chagas a été attribué à la diversité des souches de T cruzi par Carlos Chagas lui-même Les populations de parasites naturels ont une structure multiclonale complexe , avec des preuves d’échange génétique entre des lignées vaguement apparentées Les lignées ont été classées en t Les principales unités de typage discrètes DTU I et IIa-IIe, , qui ont été récemment rebaptisées T cruzi I-VI et qui ont une variété de distributions géographiques et d’associations écoépidémiologiques T cruzi I est la principale cause de la maladie de Chagas. En revanche, dans le cône sud, T cruzi II, V et VI sont impliqués dans la maladie de Chagas Les études de la diversité génétique parasitaire dans cChHD sont extrêmement La plupart des études qui ont examiné l’association des DTU avec les manifestations de la maladie de Chagas ont caractérisé des isolats de parasites récupérés des échantillons sanguins des patients, empêchant la détection de populations naturelles avec tropisme cardiaque. Dans ce contexte, nous avons appliqué des stratégies moléculaires sensibles pour caractériser T cruzi DTU aux sites de myocardite dans les échantillons d’explants cardiaques et de sang périphérique obtenus à partir d’une cohorte de patients atteints de cChHD en phase terminale. o subi une transplantation cardiaque, ainsi que des échantillons de sang et de tissus de suivi obtenus de patients ayant eu une réactivation de la maladie de Chagas

Matériaux et méthodes

Tous les patients appartenaient aux classes III et IV de la New York Heart Association. Les études échocardiographiques ont révélé une dilatation modérée à intense des cavités: la cardiopathie ischémique, la cardiopathie ischémique, la myocardiopathie et la myocardiopathie. Le diamètre moyen ventriculaire gauche était de ± mm La fraction d’éjection ventriculaire gauche moyenne, déterminée par ventriculographie radionucléide, était de% ±% Douze patients, – et – subissaient une transplantation cardiaque catégorisée en statut, et les autres étaient traités comme des candidats électifs à la transplantation ; Pour l’analyse comparative de la prévalence de DTU particuliers entre les patients avec cChHD et ceux avec indéterminée maladie de Chagas idCD, nous avons examiné des échantillons de sang et de sérum obtenus auprès de patients argentins avec idCD qui a été référé des hôpitaux Rivadavia et Gutierrez à Buenos Aires et de l’Universidad Nacional del Nordeste au Chaco. Cette étude a rempli tous les principes énoncés dans la Déclaration d’Helsinki. Elle a été approuvée par les comités d’examen des institutions participantes et un consentement éclairé a été obtenu. Des patients ou une personne responsableAnalyse des explants cardiaques Quinze coeurs explantés ont été pesés Poids moyen, ± g et fixé pour h en% de formaldéhyde tamponné au phosphate Après fixation, sections transmurales de toute la circonférence du ventricule gauche et droit à un plan équidistant de la base à l’apex ont été recueillies et intégrées dans Des coupes provenant de régions de chaque cœur ont été sélectionnées pour l’analyse histologique et moléculaire: l’apex, les parois libres ventriculaires gauche et droite, et la section du septum interventriculaire A -μm de chaque région ont été colorées à l’hématoxyline et à l’éosine et au trichrome de Masson. La myocardite a été définie selon les critères de Dallas Pour l’analyse statistique, la quantité d’infiltrat inflammatoire était semiquantifiée comme score absent, score modéré, score modéré et score sévère et sa distribution comme focale, confluente ou diffuse. semiquantified comme doux & lt;%; score,, modéré% -%; score,, et sévère & gt;%; score, Traitement immunosuppresseur Les patients recevaient un traitement immunosuppresseur triple médicament comprenant des inhibiteurs de la calcineurine, la cyclosporine ou le tacrolimus, des stéroïdes et un troisième médicament, soit l’azathioprine, le mycophénolate mofétil ou les inhibiteurs cibles de la rapamycine Deux patients recevant un traitement d’induction de la globuline antithymocytaire de lapin Les rejets cardiaques ont été caractérisés dans des échantillons de biopsie endomyocardique conformément à la classification internationale mise à jour par la Société internationale pour la transplantation cardiaque et pulmonaire Cellulose cellulaire aiguë en réponse à la toxicité, au rejet et à la réactivation de la maladie de Chagas. le rejet de grade ⩾ ou le rejet en association avec l’instabilité hémodynamique a été traité par mg de méthylprednisolone par voie intraveineuse pendant des jours. Surveillance des patients Avant ou au moment de la transplantation cardiaque, des échantillons de sang et de sérum ont été obtenus. Des échantillons et des échantillons de biopsie endomyocardique ont été recueillis sur une base de protocole Des échantillons de sang ont été testés par la méthode de Strout , kinétoplastidés ADN kDNA polymérase en chaîne PCR et épissés leader SL PCR voir « PCR-based monitoring » ci-dessous; Des échantillons de peau et de biopsie endomyocardique ont été traités comme tissus explants, et la réactivation de la maladie de Chagas a été diagnostiquée par observation de T cruzi nests Surveillance à base de PCR L’ADNc de la région variable minicircle -bp a été amplifiée à partir de -μL guanidine-EDTAblood GEB ou -μm rapportés ailleurs L’espaceur intergénique des gènes de tête épissés SL-PCR a été amplifié à partir de μL de GEB Les limites de détection pour kDNAPCR et SL-PCR étaient ~ et ~ équivalents parasitaires / mL de sang, respectivement IDentification de T cruziDTU, génotypes T cruziI, et les signatures minicircle DTU I à VI ont été identifiés en utilisant des stratégies de PCR améliorées. Figure et tableau, comme suit: SL région intergénique IR SL PCR a été utilisée pour distinguer T cruzi I bp, II, V et VI bp de T cruzi III et IV bp; la SL-IR-I héminestée a été utilisée pour identifier les DTU de T cruzi Ip, et la SL-IR-II semi-nichée a été utilisée pour identifier les DTU de T cruzi II, V et VI bp; la PCR semi-nichée de l’ADN S-ribosomal a été utilisée pour distinguer T cruzi V ou bp de T cruzi II et VI bp; et une PCR en temps réel héminestérisée ciblée sur A a été utilisée pour discriminer T cruzi II des échantillons de T cruzi VI qui ont donné des résultats de PCR SL-IR-II positifs mais des résultats négatifs d’ADN S-ribosomique ont été rapportés comme T cruzi II, V ou VI Les échantillons qui amplifiaient le fragment d’ADNr-bp Sα mais qui avaient des résultats négatifs de PCR en temps réel ciblés sur A étaient rapportés comme T cruzi II ou VI Figure

Figure Vue largeDisque de téléchargementRéaction en chaîne de polymérase Organigramme de la PCR pour l’identification des unités de typage discrètes de Trypanosoma cruzi DTU directement à partir d’échantillons de sang et de tissus humains Pour les spécifications PCR, voir Tableau le fragment A- effectué par PCR en temps réel; SL-IR, région intergénique à tête épissée; SL-IR I et II HN, réaction héminisée des PCR SL-IR I et II, respectivement; SADRAD HN, amplification héminisée du domaine D des gènes d’ARN ribosomaux SαFigure Vue détailléeDownload slidePolymérase chain reaction Diagramme PCR pour l’identification des unités de typage discrètes de Trypanosoma cruzi DTU directement à partir d’échantillons de sang et de tissus humains Pour les spécifications PCR, voir Tableau en pb et température de fusion en ° C A-HN, réaction héminestée pour le fragment A- réalisée par PCR en temps réel; SL-IR, région intergénique à tête épissée; SL-IR I et II HN, réaction héminisée des PCR SL-IR I et II, respectivement; SNA rDNA HN, amplification héminisée du domaine D des gènes d’ARN ribosomaux Sα Les produits de PCR SL-IR-I semi-nichés -bp de T cruzi I ont été soumis à un séquençage et un alignement pour l’identification des génotypes T cruzi Ia-Id, comme décrit Les produits de kDNA-PCR purifiés μg ont été digérés avec les enzymes U de MspI plus RsaI, et les profils de polymorphisme de longueur de fragment de restriction ont été visualisés après électrophorèse sur gel de polyacrylamide Western blot avec de petits antigènes de surface Trypomastigote TSSA Réactivités sérologiques contre les recombinants TSSA I et II les antigènes ont été dosés pour identifier les patients infectés par T cruzi I TSSA I ou T cruzi II, V ou VI TSSA II Glutathion S-transférase GST-TSSA-I et GST-TSSA-II, V, ou VI recombinants antigènes [ ] et GST comme témoins ont été séparés par électrophorèse sur gel de polyacrylamide de dodécylsulfate de sodium SDS-PAGE; Après blocage des filtres avec du PBS salin tamponné au phosphate avec du lait écrémé en%,: dilutions d’échantillons de sérum dans du PBS avec du lait écrémé en% ont été incubés pour h à température ambiante. Les anticorps liés ont été détectés avec: une dilution d’un anticorps anti-immunoglobuline G humain de lapin couplé à de la peroxydase de raifort HRPO; Dako et l’addition subséquente de ‘-diaminobenzidine Sigma et HO dilués dans l’analyse statistique PBSS Les variables catégorielles ont été comparées en utilisant le test or ou le test exact de Fisher et les variables continues ont été comparées en utilisant le test t non apparié ou le test U de Mann-Whitney. & lt; ont été considérés comme indiquant une signification statistique Les données pathologiques et cliniques ont été analysées à l’aide du logiciel SPSS, version SPSS

Résultats

Cette étude a appliqué un algorithme basé sur la PCR ciblant les marqueurs génomiques polymorphes pour identifier les DTU T cruzi directement à partir d’échantillons cliniques d’ADNc positif pour kDNA-PCR, d’échantillons sanguins et d’échantillons provenant de sites de réactivation de la cohorte de patients.

Tableau View largeTechniques en ligne pour l’identification de Trypanosoma cruziRéaction en chaîne de la polymérase pour une identification de Trypanosoma cruzi Unités de typage discrètes dans des échantillons de sang et de tissus humainsTable View largeTélécharger diapositivePolymérase Réaction en chaîne PCR Stratégies pour l’identification de Trypanosoma cruziTypes de typage discrets dans des échantillons de sang et de tissus humains caractéristiques de pathologie des patients argentins atteints de cChHD ayant subi une transplantation cardiaque L’amplification de l’ADN du parasite et de l’identification DTU est plus fréquente dans les spécimens d’explants cardiaques présentant des degrés plus élevés de myocardite P = Tableau et Figure A Les nids amastigotes sont observés uniquement dans les échantillons d’explants. myocardite sévère Tableau et figure Parmi les échantillons d’explants cardiaques étudiés, les DTU ont été identifiés dans des échantillons% De ces échantillons, une infection par DTU II, V ou VI a été observée en%, alors que DTU I parasites ont été observés dans toutes les populations DTU I e caractérisé en tant que génotype Tc Id Genbank numéros d’accession GQ-, FJ et FJ

Table View largeTélécharger Caractéristiques épidémiologiques et analyse histologique et moléculaire des spécimens d’explants cardiaques obtenus auprès de patients atteints de maladie chronique de la maladie de Chagas View largeTélécharger diapositive Caractéristiques épidémiologiques et analyse histologique et moléculaire des spécimens d’explants cardiaques provenant de patients atteints de maladie chronique de Chagas

Figure Vue largeDownload slideTrypanosoma cruzi unité de typage discrète DTU dans des échantillons cardiaques obtenus de patients atteints de cardiopathie chronique Chagas cChHD et comparaison de la prévalence DTU sanguins chez les patients avec cChHD versus ceux avec maladie indéterminée de Chagas idCD A, persistance de l’ADN et identification DTU dans les échantillons d’explants cardiaques avec différents degrés de myocardite Zones blanches, réaction en chaîne de l’ADN-k-polymérase Sections PCR-négatives Neg; zones noires, coupes cardiaques avec des résultats positifs pour kDNAPCR où la DTU n’a pas pu être identifiée NI; zones d’ombre, sections kDNA-PCR positives où T cruzi DTU a été caractérisée La persistance de l’ADN était plus élevée dans les spécimens d’explants cardiaques avec myocardite sévère * P = B, Anti-Trypomastigote petite réactivité antigénique de surface des échantillons de cChHD et de chez les patients atteints de cChHD par rapport à idCD après transplantation cardiaque identifiés au moyen de l’algorithme de PCR Figure ‡ P! Figure Voir grandDownload slideTrypanosoma cruzi unité de typage discrète DTU résultats dans des échantillons cardiaques obtenus de patients atteints de maladie cardiaque chronique Chagas cChHD et la comparaison de la prévalence de DTU sanguin dans patients avec cChHD par rapport à ceux avec maladie de Chagas indéterminée idCD A, persistance de l’ADN et identification DTU dans les spécimens d’explants cardiaques avec différents degrés de myocardite Zones blanches, réaction en chaîne de l’ADNc de kDNA Coupes PCR négatives Neg; zones noires, coupes cardiaques avec des résultats positifs pour kDNAPCR où la DTU n’a pas pu être identifiée NI; zones d’ombre, sections kDNA-PCR positives où T cruzi DTU a été caractérisée La persistance de l’ADN était plus élevée dans les spécimens d’explants cardiaques avec myocardite sévère * P = B, Anti-Trypomastigote petite réactivité antigénique de surface des échantillons de cChHD et de chez les patients atteints de cChHD versus IDCD après transplantation cardiaque identifiés au moyen de l’algorithme de PCR dans la figure ‡ P!

Figure Vue largeTélécharger la diapositivePourcentage des gels de polyacrylamide colorés avec du vert Sybré montrant des signatures minuscules de Trypanosoma cruzi à différents sites corporels pendant la maladie de Chagas chronique suivi cChHD Type d’échantillon et transplantation post-cardiaque La période HT en semaines est indiquée en haut, et T cruzi discrete typing unit DTU ou génotype au bas de chaque ligne Histologies histologiques des nids d’amastigotes dans les explants cardiaques et réactivation des lésions de la maladie de Chagas des patients semaine et semaine Inset illustre les amastigotes libres provenant du nid cassé A, apex; EMB, biopsie endomyocardique; HE, explant du coeur; LV, ventricule gauche; MM, échelle d’ADN -bp; ND, non déterminé; PB, sang périphérique; RV, ventricule droit; Sk, chagoma de la peau; VS, septum interventriculaireFonctionnementTélécharger diapositivePourcentage de gels de polyacrylamide colorés au vert Sybrine montrant des signatures minuscules de Trypanosoma cruzi sur différents sites corporels au cours de la maladie de Chagas chronique suivi cChHD Type d’échantillon et transplantation post-cardiaque La période HT en semaines est indiquée en haut, et T cruzi unité de typage discrète DTU ou génotype au bas de chaque ligne Histologie des nids d’amastigote dans les explants cardiaques et réactivation des lésions de la maladie de Chagas des patients semaine et semaine Inset illustre les amastigotes libres provenant du nid cassé A, apex; EMB, biopsie endomyocardique; HE, explant du coeur; LV, ventricule gauche; MM, échelle d’ADN -bp; ND, non déterminé; PB, sang périphérique; RV, ventricule droit; Sk, chagoma de la peau; VS, septum interventriculaire Études d’échantillons de sang Avant ou au moment de la transplantation cardiaque, les résultats de kDNA-PCR étaient positifs dans les échantillons sanguins obtenus chez% des patients – Tableau En revanche, les résultats SL-PCR étaient négatifs, probablement à cause de faibles charges parasitaires Ainsi, l’identification DTU a été réalisée au moyen du marqueur immunologique TSSA Patients et réactivité anti-TSSA I démontrée, le patient avait une réactivité anti-TSSA I et II, et les patients restants avaient une réactivité anti-TSSA II Tableau Comparaison de l’identification DTU basée sur TSSA dans un groupe de patients atteints de la maladie de Chagas indéterminée a révélé une fréquence plus élevée de réactivité anti-TSSA I chez les patients avec cChHD P = Figure B

en tant que marqueur précoce de la réactivation de la maladie de Chagas P = Tableau Après transplantation cardiaque, T cruzi I a été identifié dans des échantillons de sang prélevés chez% des patientes -, et Tableau La proportion de T cruzi I était plus élevée que chez les patients par l’algorithme de PCR P & lt; Figure C En outre, le génotype Tc Ia a été identifié dans des échantillons de sang obtenus des patients, et les numéros d’accès Genbank FJ, FJ et FJ, et Tc Id a été identifié dans des échantillons de sang du patient FJ T cruzi V a été identifié dans des échantillons de sang Transplantation de% des patients patients,,,, et, T cruzi VI a été identifié dans des échantillons de sang prélevés chez un patient avant les événements liés à la réactivation de la maladie de Chagas, qui ont eu lieu et quelques jours après la transplantation cardiaque. échantillons de patient patient Tableau Analyse des échantillons consécutifs de tous les patients qui ont subi une transplantation cardiaque et qui ont eu des résultats positifs SLPCR a révélé la persistance de la même DTU circulation sanguine, même chez les patients avec d’autres DTU à différents sites du corps. de la réactivation de la maladie de Chagas Cinq patients ayant eu une réactivation de patients atteints de la maladie de Chagas et une lésion cutanée Les patients ont été également traités avec du benznidazole, avec des résultats de Strout devenant négatifs et avec rémission des symptômes. Cependant, le patient a subi un deuxième épisode de réactivation de la maladie de Chagas, qui a été diagnostiquée. myocardite, jours après transplantation cardiaque Un deuxième traitement avec benznidazole a été couronné de succès, avec des résultats négatifs de Strout et PCR après des années de suivi. La réactivation de la maladie de Chagas était associée à des myocardites plus élevées dans les échantillons cardiaques explantés. des patients ayant eu une réactivation de la maladie de Chagas ont subi une transplantation cardiaque biaxiale, alors que les patients n’ayant pas eu de réactivation de la maladie de Chagas, qui ont été observés au moins pendant plusieurs jours, ont subi une transplantation cardiaque bicavale P = Tableau La réactivation de la maladie de Chagas n’a pas été associée avec l’âge, le sexe, les épisodes de rejet, les schémas thérapeutiques immunosuppresseurs ou la corticothérapie «pulsée». Tableau T cruzi I a été détecté dans des échantillons de chagoma de la peau chez des patients et dans le génotype Ia; Numéro d’accès Genbank GU, T cruzi V a été détecté chez des patients dans des échantillons de biopsie endomyocardique et des échantillons cutanés, T cruzi VI a été détecté chez des patients dans des échantillons de peau et de biopsie endomyocardique pour le premier et le deuxième épisode de réactivation de la maladie de Chagas. , V, ou VI a été détectée dans des échantillons de peau de patients Tableau Dans l’ensemble, les infections à T cruzi I ont été identifiées chez des patients ayant un% de cChHD; Parmi eux, l’infection à T cruzi I était l’infection unique, et dans celle-ci, elle se chevauchait avec l’infection par le patient T cruzi V ou II, V ou VI et T cruzi V était identifiée chez les patients patients,,, et T cruzi VI a été identifié chez le patient, T cruzi II / VI a été identifié chez le patient, et la réactivité anti-TSSA II a été détectée chez les patients PCR-négatifs restants – Tableau Chez les patients infectés par T cruzi I plus V ou Populations II, V ou VI, différentes distributions tissulaires de chaque DTU ont été trouvées, comme suit: chez le patient, la réactivité anti-TSSA-II a été noté, T cruzi II / VI a été noté dans des échantillons d’explants cardiaques, T cruzi Ia a été détecté dans des échantillons sanguins de transplantation post-cardiaque, et T cruzi II, V ou VI ont été détectés dans des échantillons de chagoma de la peau; chez le patient, des réactivités anti-TSSA I et II se sont produites, T cruzi Id a été détecté dans des échantillons d’explants cardiaques, et T cruzi V a été détecté dans des échantillons de sang et de chagoma de transplantation post-cardiaque; et dans le patient, la réactivité anti-TSSA II s’est produite, et T cruzi Id a été détecté dans des échantillons de sang de transplantation post-cardiaqueParasite minicircle signatures Empreintes digitales de signatures de minicircle Figure populations polymorphes révélées d’une même DTU infectant patients patients et; T cruzi V dans les échantillons de sang périphérique montrant une diversité intra-DTU Les populations T cruzi I représentaient un plus grand nombre de fragments de restriction que les populations T cruzi V ou VI, suggérant une plus grande hétérogénéité des classes miniculaires et / ou des degrés de clonalité et des patients. En outre, le polymorphisme de l’ADNc de différents DTU et génotypes T cruzi I détectés à différents sites du corps d’un même patient patients,, et; explant cardiaque par rapport à des échantillons de sang périphérique ou même dans différentes sections d’un même patient explant; En revanche, chez un patient infecté par le patient T cruzi VI, des signatures presque identiques ont été profilées au niveau de différents sites du corps: septum interventriculaire, échantillon de sang périphérique et échantillons de biopsie endomyocardique.

Discussion

Des études antérieures sur des échantillons de sérum , des isolats de culture prélevés sur des échantillons de sang périphérique et des prélèvements cliniques au cône sud de l’Amérique ont révélé des infections chez l’homme T cruzi II, V et VI, renforçant le concept de T cruzi Je n’entraîne pas la maladie de Chagas dans la région Cette étude longitudinale a intégré les résultats des tissus cardiaques, des prélèvements sanguins et des lésions associées à la réactivation de la maladie de Chagas d’une cohorte de patients atteints de cChHD subissant une transplantation cardiaque. I hébergeaient des infections à T. cruzi I et étaient co-infectées avec d’autres DTU, détectables à différents sites corporels et périodes de suivi. Une proportion significative de populations cardiaques T cruzi I parmi les patients argentins atteints de cChHD était étonnante. Les amplicons IR ont permis de confirmer les résultats du test DTU I, révélant ainsi les génotypes Tc Ia et Tc Id À notre connaissance, il s’agit du premier rapport Tc Id a été identifié dans tous les échantillons d’explants cardiaques génotypés, même dans des échantillons d’un patient avec Tc Ia dans des échantillons de sang et de chagoma de la peau, suggérant l’histotropisme génotypiqueAvant ou au moment du coeur transplantation, les échantillons de sang de la plupart des patients infectés par T cruzi I ont eu des résultats kDNA-PCR et SL-PCR négatifs, indiquant des charges parasitaires plus faibles que les populations II, V ou VI Tableau Ceci peut expliquer la faible prévalence de T cruzi I dans les échantillons sanguins Les patients argentins atteints d’IDCD et le fait qu’il était principalement détectable dans le tissu cardiaque ou des échantillons de sang chez les personnes recevant un traitement immunosuppresseur, en accord avec les résultats récents dans un cas de maladie de Chagas cérébrale due au SIDA T cruzi I cChHD des provinces septentrionales du Chaco et de Santiago del Estero, vers le nord; longitude, ° W- ° W, T cruzi I et II, V ou VI ont été identifiés dans les provinces du nord de la latitude de Salta et Jujuy, ° S- ° S; longitude, ° W- ° W, T cruzi II / VI ou VI dans la latitude de La Pampa, ° S; longitude, ° W, et T cruzi V était plus omniprésente latitude, ° S- ° S; Notre analyse des échantillons d’explants cardiaques fournit des preuves supplémentaires de l’implication de la persistance du parasite dans la pathogenèse de la myocardite et de la cChHD, confirmant les études immunochimiques et moléculaires précédentes. Réactivation associée à la sévérité de la myocardite et à la persistance du parasite En outre, la réactivation de la maladie de Chagas est apparue liée à la technique de transplantation cardiaque, étant donné que la réactivation de la maladie de Chagas est liée à la transplantation cardiaque. La technique biatrique détermine que des parties de l’oreillette du récepteur ne sont pas explantées. Palomino et al ont observé de fortes intensités d’inflammation dans la paroi postérieure de l’oreillette droite chez des patients ayant subi une transplantation bia- valale. coeurs cartographiés en détail A Une image similaire pourrait se produire dans l’oreillette de nos patients ayant subi une transplantation cardiaque, favorisant la prolifération parasitaire et l’invasion du cœur implanté entraînant une myocardite. Dans la présente étude, des lésions cutanées ont été observées et une myocardite a été observée chez les patients. dans d’autres cohortes La réactivation a été associée à des résultats SL-PCR sanguins positifs et antérieurs accompagnant des augmentations de la charge parasitaire, démontrées par PCR quantitative en temps réel dans des échantillons de patients – , montrant le potentiel de PCR quantitative en temps réel. La réactivation peut être traitée par le benznidazole , l’allopurinol ou, très récemment, par le posaconazole Dans notre cohorte, les patients ayant eu une réactivation de la maladie de Chagas et qui ont été infectés tout DTU TUZZI répond avec succès au traitement actuel au benznidazole Seule l’expérience du patient d un deuxième épisode de réactivation de la maladie de Chagas; ce patient a été infecté par une population monoclonale de T cruzi VI, comme démontré par des études sur le polymorphisme des loci microsatellites , indiquant que la population réémergée à la deuxième réactivation de la maladie de Chagas n’a pas été éradiquée après le premier cycle de traitement. que T cruzi I et II sont d’anciennes lignées parentales , alors que T cruzi V et VI sont des produits polyphylétiques de ⩾ événement d’hybridation [, -] Nos résultats soutiennent le concept que cChHD peut être causée par de multiples clones parasitaires parentaux et hybrides DTU, conforme à un scénario naturel pour les événements de recombinaison interspécifique et l’évolution des DTU

Remerciements

Ce travail est dédié à la mémoire du Dr Mariano Jorge Levin mort en février dernier, à la tête du LabMECh, INGEBI-CONICET, dont la vie était dédiée à la recherche sur la pathogenèse de la maladie de Chagas. qui a participé à l’élaboration de cette étudeNous remercions Antonia Natello, Marcela Alvarez et Hôpital Silvana Romero Universitario-Fundación Favaloro, Bs Comme pour le traitement des transplantés cardiaques et pour la collecte et la préparation histologique des échantillons Nous remercions Dr Daniel Merino Université Nacional del Nordeste, Chaco , Dr Hector Freilij Hôpital Ricardo Gutiérrez, Buenos Aires et Dr María E Seidenstein Hôpital Rivadavia, Buenos Aires pour le recrutement de patients avec IDChDF soutien financier Agence nationale des sciences et de la technologie FONCYT BID -OC-AR et PICT -; PICTO à RHL et AGS, CONICET PIP, et Bunge & amp; Borne PIP – – vers les conflits d’intérêts AGS et MJLPotential Tous les auteurs: pas de conflits