Patients atteints d’une encéphalite à herpès simplex soupçonnée: Repenser un résultat négatif initial d’une réaction en chaîne de la polymérase

Un projet de diagnostic de l’encéphalite à l’échelle du département des services de santé de l’État de Californie a révélé que l’ADN du virus de l’herpès simplex pourrait ne pas être détectable par des méthodes moléculaires au début de l’évolution clinique de l’encéphalite herpétique

Nous décrivons des patients atteints d’herpès simplex encéphalite HSE dont les résultats initiaux de PCR étaient négatifs pour le virus de l’herpès simplex HSV-Patient Une fille blanche auparavant en bonne santé avec des plaintes principales de léthargie croissante et de fièvre a été vu au service des urgences. elle était aphasique, inattentive et bave. Elle avait les lèvres enflées et éprouvait de la difficulté à ouvrir la bouche. Ses signes vitaux étaient les suivants: température, ° C; pouls, battements / min; Elle a répondu à son nom avec un signe de reconnaissance non verbale et a suivi visuellement ses parents, mais elle n’a pas pu suivre les commandes À l’admission, sa numération globulaire complète était normale et les résultats de l’imagerie thoracique et cervicale étaient également normaux Trois jours avant l’admission, le patient avait présenté des épisodes de vomissements, de somnolence et des symptômes d’une infection des voies respiratoires supérieures. Le patient avait brièvement éprouvé une désorientation et avait des «difficultés à trouver des mots» un jour avant l’admission; À l’époque, elle était fébrile et léthargique. L’évaluation des antécédents médicaux du patient n’a révélé aucun résultat anormal. Les résultats d’un examen des systèmes étaient sans particularité. Le patient n’avait eu aucun épisode récent d’éruption cutanée, de dysphasie, de dysarthrie, de perte de poids, en vision Elle ne prenait pas de médicaments régulièrement, et aucune exposition animale significative ou voyage étranger n’a été identifié. L’analyse d’un échantillon de liquide céphalorachidien obtenu à la ponction lombaire LP réalisée au moment de l’admission a montré un nombre de globules blancs / ml de lymphocytes% monocytes, et% neutrophiles, un niveau de protéine de g / dL, et un niveau de glucose de mg / dL tomodensitométrie de la tête a montré une petite zone d’atténuation diminuée dans le lobe frontal gauche et l’effet de masse associé dans le lobe latéral gauche Le traitement par la doxycycline et l’acyclovir a été initié. Les échantillons de LCR obtenus au cours de la LP initiale se sont révélés négatifs pour le HSV par PCR réalisée dans les laboratoires: le laboratoire hospitalier le dépistage ciblé du VHS, un dépistage privé du VHS ciblé par un laboratoire privé, et la séquence consensus du laboratoire d’état, les tests de PCR pour les herpèsvirus, y compris le VHS-tableau

Tableau View largeTélécharger les caractéristiques cliniques et de laboratoire des patients atteints d’encéphalite à herpès simplex qui ont eu un résultat négatif initial de PCRTable View largeTélécharger la lameClinical et les caractéristiques de laboratoire des patients atteints d’encéphalite herpétique simplex qui ont eu un résultat PCR négatif initial

méthode utile pour diagnostiquer la HSE au début de l’infection Cependant, des cas de HSE ont été signalés chez des sujets pour lesquels un échantillon de LCR obtenu au début de la maladie était négatif pour le VHS par PCR mais pour lesquels les échantillons de LCR ont obtenu quelques résultats. Dans une étude prospective sur des patients adultes atteints d’encéphalite virale aiguë, les patients ont été diagnostiqués HSE par analyse PCR d’échantillons de LCR. Pour ces patients, les échantillons de LCR obtenus à l’admission étaient négatifs. Dans une étude rétrospective portant sur des patients atteints d’encéphalite à HSV, le patient a obtenu un résultat PCR négatif pour un échantillon de liquide céphalo-rachidien obtenu le troisième jour après le début de la maladie mais un résultat de PCR positif pour un échantillon de liquide céphalorachidien obtenu à partir d’un LP effectué quelques jours plus tard Il existe d’autres études dans lesquelles les patients avec HSE dont les résultats initiaux de PCR étaient négatifs pour HSV-tôt au cours de l’infe Le projet CEP de l’encéphalite de Californie effectue des tests de diagnostic sur des échantillons prélevés chez des patients immunocompétents, auparavant en bonne santé, atteints d’encéphalite et qui sont des patients atteints d’encéphalite. Bien que le laboratoire d’État teste les échantillons de LCR pour l’ADN HSV en utilisant un test PCR de séquence consensus, le CEP encourage fortement que tous les échantillons de patients soient également analysés par PCR pour un HSV ciblé dans un autre laboratoire. En décembre, les échantillons de LCR des patients atteints d’encéphalite enrôlés dans le CEP avaient subi une PCR pour la détection de la PCR commerciale du HSV-A. Argene-Biosoft a été utilisé pour tester les herpèsvirus Ce kit utilise des amorces d’amorces consensus, capables d’amplifier le HSV, le HSV, le cytomégalovirus, le virus d’Epstein-Barr, le virus varicelle-zona et l’herpèsvirus humain en une seule réaction Pour les tests sérologiques, un test d’anticorps pour la détection d’IgG anti-HSV est effectué sur des échantillons de sérum appariés en utilisant un EIA, et une valeur d’indice est déterminée pour chaque échantillon Un total de% de patients dans le Le PEC avait des résultats de PCR positifs pour le VHS-Trois pour cent de ces patients avaient des résultats négatifs au test de PCR initial pour les échantillons de VHS-dans le LCR obtenus au moment de l’admission; Ces patients ont ensuite eu des résultats de PCR positifs pour les échantillons de LCR obtenus au, et quelques jours après le premier LP. Ces patients présentaient des résultats de tests sérologiques qui étayaient les diagnostics de HSE et des résultats cliniques cohérents avec le tableau HSE. le temps d’initiation du traitement On a spéculé qu’une augmentation du niveau d’HSV-ADN survient au cours des premiers jours d’administration de la thérapie antivirale, ce qui peut être responsable de cette découverte HSE évolue généralement sur plusieurs jours et est associée à détérioration progressive de la conscience Les patients que nous décrivons présentaient des symptômes du SNC pendant seulement quelques jours avant l’admission. Cela suggérerait que ces patients se sont présentés relativement tôt durant l’évolution clinique de l’HSE, et qu’ils pourraient avoir un très faible nombre de copies. ADN présent dans l’échantillon initial de CSFLes méthodes de PCR conventionnelles pour la détection du HSV ont été utilisées par les différents laboratoires dans l’évaluation de ces patients; les méthodes avaient des sensibilités comparables. Tableau La PCR nichée est considérée comme plus sensible que la PCR conventionnelle car elle comprend une seconde étape d’amplification; Théoriquement, la procédure est capable de détecter une copie unique de l’ADN-HSV cible Parce que les laboratoires impliqués dans les tests diagnostiques de ces patients utilisent la PCR conventionnelle, il est important d’être conscient des résultats négatifs obtenus dans ces circonstances. les résultats de PCR négatifs obtenus pour les cas que nous rapportons ne sont probablement pas le résultat d’inhibiteurs, car l’ADN polymérase Elongase Gibco BRL utilisée par notre laboratoire est moins affectée par l’hémoglobine que l’ADN polymérase Taq. En outre, les échantillons CSF initiaux tout avait & lt; Enfin, les inhibiteurs sont généralement moins problématiques pour le test PCR du LCR que pour le test PCR d’autres fluides corporels ou d’extraits tissulaires. L’observation des résultats négatifs initiaux de la PCR pour un petit nombre mais notable des patients avec une infection HSE confirmée indique qu’un résultat PCR négatif pour le HSV au début de l’infection n’exclut pas la présence de HSE Le diagnostic de HSE doit être basé sur les résultats cliniques en combinaison avec les résultats des tests de neuro-imagerie et de diagnostic Pour les patients pour lesquels une infection à HSV est encore suspectée, c’est-à-dire pour ceux qui ont une atteinte du lobe temporal et aucun diagnostic alternatif, un second LP et un test subséquent de PCR pour le HSV doivent être considérés

Remerciements

Nous remercions George F. Brooks, Giorgio Cosentino, Cynthia Cossen, David Cottam, Fred Drach, Sabrina Gilliam, Mary Ellen Guroy, Somayeh Honarmand, David Lennette, Evelyne Lennette, Gordon Shell, James Sejvar et Erica Steffe pour leur aide précieuse